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GenotipadoVolver

Con el Secuenciador Automático MegaBACE500(GE Healthcare) se pueden utilizar hasta 4 marcadores fluorescentes simultáneamente: FAM, TMR, HEX y ET-ROX, este último reservado para el marcador de tamaños moleculares, y combinar diferentes tamaños alélicos en la misma muestra, por lo que por cada capilar en una sola electroforesis se pueden analizar multitud de fragmentos.

MODALIDADES
  • Autoanálisis y autoanálisis sin material de carga

    • Dada la especificidad de la técnica, el Servicio se hará cargo únicamente de la etapa final, es decir, de la separación y análisis de los fragmentos mediante electroforesis.

    • En algunos casos puede ser necesario un paso de purificación de los fragmentos (ExoSAP-IT(GE Healthcare) o precipitación con etanol) antes del proceso de electroforesis.

    • Para la determinación de los tamaños el Servicio dispone del marcador de pesos moleculares "MegaBACE ET-400-R", con un total de 20 fragmentos en un rango entre 60 y 400 pb y con emisión de fluorescencia a 610 nm (ET-ROX), si bien pueden usarse los marcadores de GE Healthcare "MegaBACE ET-550-R" y "MegaBACE ET-900-R", o cualquier otro marcador de tamaño marcado con ET-ROX aportado por el usuario.

    • El usuario entregará junto con las muestras, una hoja Excel (Envio Muestras Genotipado) con el diseño de la placa en el que se incluyan los nombres de las muestras, el orden en el que desea cargarlas y la descripción de los distintos polimorfismos que se van a analizar.



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